雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒
采用生物發光(bioluminescent)法對報告基因進行檢測是最常用的有效手段。螢光素酶(luciferase)能催化底物螢光素(luciferin)的轉化,發射出光子。螢火蟲螢光素酶(Firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Ranilla luciferase)催化的發光反應,具有相似的光學特征和很好的濃度線性范圍(7~8個數量級的線性范圍),酶的檢測靈敏度達10-14~10-20?mol,但兩者催化的化學反應底物和最適反應條件完全不同。利用這一特性,將這兩種螢光素酶配合,即可形成十分有效的雙螢光素酶報告基因系統,其中Ranilla luciferase通常作為內參照。
雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒可在單個樣品中依次檢測螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶,為雙螢光素酶報告基因的檢測提供了有效的手段。試劑盒中的Cell Lysis Buffer適合于兩種螢光素酶活性的保持,且兼容于其他類型的報告基因和蛋白定量檢測試劑。優化的酶反應體系,使每種酶的螢光半衰期超過15min,以便同時操作多個樣品,并保證螢火蟲螢光素酶的發光及時淬滅,也不影響隨后的海腎螢光素酶的檢測。